Жасушаның оңтайлы өсуі мен эксперимент нәтижелерін қамтамасыз ету үшін дұрыс культуралық құралды таңдау өте маңызды. Жасуша өсіретін ыдыстарды таңдаған кезде жасуша түрі, культураның нақты мақсаты, культураның масштабы, қоректік ортаның түрі, ыдыстардың материалдары мен өлшемдері, беттік өңдеулер, тиісті қақпақтар сияқты факторларды ескеру маңызды. газ алмасу және олардың зертханалық жабдықпен үйлесімділігі.
Міне, дұрыс жасуша өсіретін ыдысты таңдау кезінде ескеру қажет негізгі факторлар
1. Жасушалардың түріне қарай жасуша өсіретін ыдысты таңдаңыз
Жабысқан жасушалар
Бұл жасушаларға жабысып, таралуы үшін бет қажет. Жабысқақ жасушалар үшін сізге жасушаларды бекіту және өсіру үшін жеткілікті кеңістікті қамтамасыз ететін беті бар ыдыстар қажет.
Мысалдар Тіндердің культурасымен өңделген колбалар, петри табақшалары және көп шұңқырлы пластиналар.
Суспензия жасушалары
Бұл жасушалар ортада қалқып өседі, сондықтан беті қарастырылмайды.
2. Өлшеміне қарай жасуша өсіретін ыдысты таңдаңыз (көлемдік сыйымдылық)
Шағын көлемді мәдениеттер
Шағын масштабты эксперименттер немесе жоғары өнімді скрининг үшін кішірек ыдыстар өте қолайлы.
Мысалдар Көп шұңқырлы пластиналар (6, 24, 96 ұяшықты культуралық пластиналар),
Петри табақшалары, немесе T25 колбалары.
Ауқымды мәдениеттер
Егер сізге жасушалардың көп мөлшерін өсіру қажет болса, үлкенірек ыдыстар немесе биореакторлар жақсырақ.
Мысалдар T75 және T175 жасуша культурасына арналған колбалар, биореакторлар немесе суспензия жасушалары дақылдарына арналған спиннер колбалары.
3. Беттік өңдеу негізінде жасуша өсіретін ыдысты таңдаңыз
Тіндердің мәдениетімен өңделген беттер
Тамырлар жасушалардың қосылуын ынталандыру үшін алдын ала өңделеді, бұл оларды жабысатын жасуша түрлеріне қолайлы етеді. Олар әдетте коллаген, фибронектин немесе басқа жасушадан тыс матрица компоненттері сияқты заттармен қапталған.
Өңделмеген беттер
Суспензия дақылдары үшін немесе жасушалардың бетіне жабысу қажет болмаған кезде өте қолайлы. Олар әдетте ортада еркін өсетін жасушалар үшін қолданылады.
4. Материалға қарай жасуша өсіретін ыдысты таңдаңыз
Полистирол әдетте стандартты жасуша мәдениетін қолдану үшін қолданылады. Бұл түсінікті, визуалды тексеруді жеңілдетеді және жабысатын және суспензия жасушалары үшін жақсы жұмыс істейді.
Поликарбонат немесе полипропилен белгілі бір биореактор қолданбалары үшін және икемділікті немесе арнайы бетті өңдеуді қажет ететін ыдыстар үшін қолданылады.
Бағасы мен сынғыштығына байланысты стандартты ұлпа мәдениеті үшін пайдаланылатын шыны, шыны ыдыстар арнайы қолданбаларға немесе ауқымды дақылдарға жарамды болуы мүмкін.
Колбалар
Жалпы жасуша культурасы үшін әдетте Т-колбалар (T25, T75, T150) қолданылады. Тегіс бет жасушалардың бекітілуіне және өсуіне жақсы аймақты қамтамасыз етеді. Тиісті шарттар сақталса, олар жабысатын жасушалар үшін де, суспензия дақылдары үшін де қолданылуы мүмкін.
Петри табақшалары
Кішігірім масштабты дақылдар үшін және колонияларды қалыптастыру талдаулары сияқты бақылауды қажет ететін эксперименттер үшін ортақ.
Көп шұңқырлы тақталар
Бұл жоғары өнімді скрининг және кішірек ауқымды эксперименттер үшін пайдалы. 6, 12, 24, 48,
96, немесе 384 ұңғымалар қол жетімді және олар жасуша негізіндегі талдаулар, цитокиндердің шығарылуы, дәрілік сынақтар және басқа да жоғары өткізу қабілеті бар қолданбалар үшін өте қолайлы.
Айналдырғыш колбалар
Суспензия жасушаларының дақылдары үшін, әсіресе жасушалардың өсуін сақтау және жасушалардың жиналуын болдырмау үшін бақыланатын араластыру қажет болатын үлкен көлемде қолданылады.
Биореакторлар
Кең ауқымды суспензия культурасы үшін биореакторлар қоршаған орта жағдайларын (мысалы, рН, температура, оттегімен қамтамасыз ету) күрделірек бақылауға мүмкіндік береді және биофармацевтикалық өндіріс сияқты үлкен көлемдегі өндіріс үшін пайдаланылады.
6. Стерильділік және желдету негізінде жасуша өсіретін ыдысты таңдаңыз
Стерилділік
Ластануды болдырмау үшін ыдыстың зарарсыздандырылғанына немесе зарарсыздандырылғанына көз жеткізіңіз. Коммерциялық өсіретін ыдыстардың көпшілігі алдын ала зарарсыздандырылған, бірақ әрқашан қаптаманы тексеріңіз.
Желдету
Кейбір ыдыстар, мысалы, колбалар, ластануды болдырмай, ауа алмасуға мүмкіндік беретін желдеткіш қақпақтармен немесе сүзгілермен келеді. Бұл жоғары тығыздық жағдайында жасушаларды өсіру кезінде өте маңызды.
7. Қолдану ыңғайлылығына қарай жасуша өсіретін ыдысты таңдаңыз
Автоклавты және бір рет қолданылатын
Кейбір культура ыдыстарын қайта пайдалану үшін автоклавтауға болады (мысалы, шыны бөтелкелер, белгілі бір пластикалық колбалар), ал басқалары бір реттік және бір реттік (мысалы, пластикалық петри табақшалары, көп ұңғымалы табақшалар).
Өңдеу және тасымалдау
Тамырлар арасында жасушаларды тасымалдаудың қарапайымдылығын қарастырыңыз. Мысалы, көп шұңқырлы тақталар автоматтандырылған тамшуырлар сияқты жабдықпен оңай өңдеу үшін арнайы пластиналарды қажет етуі мүмкін.
8. Қоректік ортаның көлеміне қарай жасуша өсіретін ыдысты таңдаңыз
Ресурстарды ысырап етпейтін қоректік ортаның қажетті көлемін сыйдыра алатын ыдысты таңдаңыз. Үлкен көлемді культурамен жұмыс істегенде, үлкенірек колбалар немесе биореакторлар қажет болуы мүмкін, ал кішірек көлемдер жасуша өсіретін ыдыстар немесе пластиналар үшін қолайлы.
9. Шығындарды ескере отырып, жасуша өсіретін ыдысты таңдаңыз
Бір рет қолданылатын және қайта пайдалануға болатын
Бір рет қолданылатын пластикалық ыдыстар үнемді және ластану қаупін азайтады, бірақ олар ауқымды операциялар үшін қымбат болуы мүмкін. Қайта пайдалануға болатын шыны ыдыстардың бастапқы құны жоғарырақ, бірақ оларды зарарсыздандыруға және бірнеше рет қайта пайдалануға болады, бұл оларды ұзақ мерзімді пайдалану үшін үнемді етеді.
Көлем тиімділігі
Материалдарды ысырап етпеу үшін ыдыс өлшемі сәйкес келетініне көз жеткізіңіз, әсіресе қымбат өсу ортасын немесе реагенттерді пайдаланған кезде.
10. Арнайы қолдану талаптары негізінде жасуша өсіретін ыдысты таңдаңыз
Бейнелеу
Жасушаларды микроскоп астында визуализациялау қажет болса, оптикалық таза материалдары бар ыдыстарды және кескін орнату үшін сәйкес өлшемдерді таңдаңыз (мысалы, жоғары мазмұнды скринингке арналған көп шұңқырлы тақталар немесе тірі жасушаны бейнелеуге арналған шыны түбі бар ыдыстар).
Бақыланатын үгіт
Суспензиялы жасуша дақылдары үшін жасушаларды біркелкі суспензияда ұстау үшін бақыланатын араластыруды қамтамасыз ететін спиннер колбаларын немесе биореакторларды қарастырыңыз.
Қорытынды
Жасуша өсіретін ыдысты дұрыс таңдау жасуша түрін, культура масштабын, материалдың үйлесімділігін және арнайы эксперименттік қажеттіліктерді қоса алғанда, бірнеше факторларды теңестіруді талап етеді. Жабысқақ жасушалар ілінісуге ықпал ететін беттерді қажет етеді, ал суспензия жасушалары үлкен көлемдер мен араластырудан пайда көреді. Шағын көлемді жұмыстар үшін көп ұңғымалы пластиналар немесе Т-колбалар жеткілікті болуы мүмкін, ал үлкен дақылдар үшін спиннер колбалары немесе биореакторлар қажет болуы мүмкін. Ыдыстардың стерильділік пен өңдеу талаптарына сәйкес келетініне әрқашан көз жеткізіңіз және пайдалануыңызға негізделген үнемділігін ескеріңіз.
Осы факторларды ескере отырып, сіз жасуша мәдениеті мен эксперименттік мақсаттарыңыз үшін дұрыс жағдайларды қамтамасыз ететін оңтайлы ыдысты таңдай аласыз.